Investigation of thermal stability of recombinant human interferon-gamma

Abstract

Our studies in the structure and biological function of recombinant human interferon gamma (IFN-y) showed that IFN-y was stable at -20 C if to analyse the quantity of its monomeric form (MW 17240 Da). The protein aggregated and degraded at a temperature of +37 and +50 C. The degradants became visible in SDS-PAGE after 5 days and oligomeric forms after 10 days (+37 C).[...].

Baltymų PAAG-SDS elektroforezės metodu nustatyta, kad gamainterferono (IFN-g) tirpalas, saugomas -20^0 C temperatūroje, nepakito pagal monomerinės (molekulinė masė 17240 Da) formos kiekį. Baltymas kinta saugant jo tirpalą aukštesnėje temperatūroje (+37^0 C ir +50^0 C): atsiranda dimerų ir degradantų. Oligomerinės formos bei mažesnės molekulinės masės fragmentai susidaro po paros +50^0 C temperatūroje. Saugant baltymo tirpalą +37^0 C temperatūroje, degradantai stebimi po 5 parų, o agreguotos formos susidaro po 10 parų. Susidariusių oligomerinių formų bei degradantų molekulinė masė buvo 33000 Da ir 31000 Da (+37^0 C) bei 35000 - 32000 Da ribose (+50^0 C). Už monomerinę formą mažesnių degradantų molekulinė masė buvo 16000 - 11000 Da ribose. Panaudojus proteazių inhibitorius paaiškėjo, kad IFN-gama sąveikaudamas su PMSF sudaro dimerines formas, o EDTA šiek tiek pristabdo degradantų susidarymą.