Priešuždegiminio ekstraląstelinių vezikulių poveikio tyrimai žmogaus mikroglijos ląstelėse

Abstract

Baigiamajame magistro darbe nagrinėjamas galimas mezenchiminių kamieninių ląstelių sekretuojamų ekstraląstelinių vezikulių panaudojimas uždegiminei mikroglijos aktyvacijai slopinti. Išnagrinėti pagrindiniai veiksniai, lemiantys žmogaus mikroglijos ląstelių aktyvaciją, išanalizuoti ląstelių aktyvacijos reguliaciniai mechanizmai bei jų sutrikimai. Akcentuojama NF-κB signalinio kelio reikšmė imuniniam atsakui bei neurodegeneracinių ligų atsiradimui ir vystymuisi. Ekstraląstelinių vezikulių prieuždegiminio poveikio tyrimui naudojama žmogaus mikroglijos ląstelių reporterinė linija. Pagal reporterinio baltymo (sekretuojamos šarminės fosfatazės) veikimo intensyvumą įvertintas NF-κB signalinio kelio aktyvumas bei ekstraląstelinių vezikulių poveikis jam. Atlikta gautų duomenų statistinė analizė ir įvertinti gauti rezultatai. Aptariamas ekstraląstelinių vezikulių poveikis NF-κB signalinio kelio aktyvumui, poveikio priklausomybė nuo veikimo laiko bei galimi veikimo mechanizmai.

In this master’s thesis we are analizing extracellular vesicles derived from mesenchymal stem cells as possible tool to reduce proinflammatory activation of human microglial cells. We study how human microglial cells are activated, what factors are involved in this process. We focus on how activation of microglial cells is regulated through NF-κB signaling pathway, as changes in this pathway is associated with neurodegeneration disorders. To evaluate how extracellular vesicles impacts proinflamatory response we used human microglial reporter cells. Reporter cells express specific protein (secreted alkaline phosphatase) if NF-κB signaling pathway is activated. Analazing how function of secreted alkaline pfosphatase changes under the effect of extracellular vesicles we evaluated activity of NF-κB signaling pathway in microglial cells. By studying the results we made the conclusions on how extracellular vesicles changes proinflammatory response in human microglial cells, how this effect changes through time and also discuss the possible working mechanisms.