Kryptingas antikūnų imobilizavimas aukso paviršiuje

Abstract

Pastaruoju metu sparčiai vystosi imunoanalizinių sistemų kūrimas ir taikymas klinikiniuose ir farmakologiniuose tyrimuose bei aplinkos užterštumo kontrolėje. Imunosensoriaus jautrumas labai priklauso nuo paviršiuje kryptingai imobilizuotų antikūnų kiekio bei jų sugebėjimo sąveikauti su antigenu. Darbo metu buvo tiriamas kryptingas antikūnų imobilizavimas kvarco kristalo padengto aukso sluoksniu paviršiuje. Šiam tikslui naudojome skaldytus imunoglobulinų fragmentus, kurie prisijungia aukso paviršiuje per laisvas merkapto grupes. Nustatyta, kad naudojant skirtingas antikūnų skaldymo sąlygas skiriasi ir paviršiuje kryptingai imobilizuotų antikūnų kiekis, bet antigeną surišančios sritys išlieka nepažeistos. Šiame darbe kvarco kristalo mikrogravimetrijos metodas buvo pritaikytas kryptingo antikūnų imobilizavimo efektyvumo bei sąveikos su galvijų leukozės viruso antigenu gp51 tyrimuose.

Antibody immobilization is an important subject with a variety of purposes such as in diagnostic immunoassays. The study of immunosensors is important in many research fields. The direct and oriented attachment of antibodies and their frag-ments to the gold surface seems to be the most important for immunosensors. During this work we used quartz crystal surface coated with gold for application in immunosensors design. We explored different conditions of antibodies reduction by ditiotreitol solution. By this way reduced antibodies were used successfully to create immunosensor for bovine leukemia antigen detection.