Heterologinės gliukozės dehidrogenazės bei GDH-ab raiškos analizavimas mielėse

Abstract

Ištirti gliukozės dehidrogenazės geno bei hibridinio darinio, turinčio papildomą abeta peptido seką, raiškos ypatumai S. Cerevisiae mielėse, naudojant konstitutyvų ADH1 ir galaktoze indukuojamą GAL-CYC1 promotorius. Nustatyta, kad optimali bakterinės GDH ir sulieto GDH-ab darinio raiška mielėse pasiekiama tik naudojant indukuojamą ekspresijos sistemą. Gauti duomenys leidžia manyti, kad transformantų kultūros dėl plazmidžių genetinio nestabilumo sukaupia mažesnius norimų baltymų kiekius.

Expression pecularities of the glucose dehydrogenase gene and its hybrid, bearing an additional Abeta peptide sequence, controlled by constitutive ADH1 and galactose-inducible GAL-CYC1 promoters in yeast S. cerevisiae were investigated. It was found that the optimal expression level of bacterial GDH and GDH-ab is achieved only by the using of inducible expression system. The obtained data suggest, the plasmid genetic instability of yeast transformants leads to accumulation lower quantities of the desired protein